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WDR5双切口酶质粒(h) | sc-402425-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
WDR5(WD 重复结构域蛋白 5)编码一种核心的、与染色质相关的支架蛋白,可与组蛋白 H3 结合,并协调负责在活性启动子处进行 H3K4 甲基化的 COMPASS/MLL 复合体的组装。通过这些相互作用,WDR5 调控控制细胞周期进程、谱系决定以及干性样状态维持的转录程序,同时也参与 RNA 聚合酶 II 的转录延伸与增强子功能。WDR5 还与 MYC 依赖的基因表达及其他染色质调控因子发生表观遗传层面的串话,从而共同塑造全局染色质可及性。在多种疾病背景下,WDR5 相关的染色质重塑与 H3K4 甲基化失调与发育基因表达异常以及致癌性转录回路有关。
WDR5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 WDR5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对WDR5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏WDR5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了WDR5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。