Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
VWA5B2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406578
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- VWA5B2 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在VWA5B2基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
VWA5B2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-406578 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
VWA5B2 编码一种含有类 von Willebrand 因子 A（VWA）结构域的蛋白。VWA 结构域是一种模块化基序，常参与蛋白–蛋白相互作用，从而支持细胞外基质的组织、与黏附相关的信号传导以及组织结构的维持。尽管相较于许多含 VWA 结构域的蛋白，VWA5B2 的研究表征仍不够充分，但其预测的结构域组成提示其可能参与锚定或支架复合体的形成，从而影响细胞黏附、运动能力与力学信号转导。黏附与基质相关过程的调控异常常与生长控制失衡和侵袭性表型相关，因此 VWA5B2 是研究“细胞–基质相互作用如何耦联到基因表达与细胞骨架动力学”相关通路的有用靶点。因而，对 VWA5B2 进行遗传扰动可帮助界定其在疾病相关细胞状态中所见的情境依赖性应激反应与网络重塑中的贡献。
VWA5B2 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中VWA5B2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对VWA5B2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏VWA5B2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使VWA5B2蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建VWA5B2缺失的细胞模型，用于VWA5B2信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 VWA5B2 功能至关重要的 VWA5B2 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 VWA5B2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 VWA5B2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 VWA5B2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 VWA5B2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 VWA5B2 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 VWA5B2 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由VWA5B2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定VWA5B2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。