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VSTM2LCRISPR激活质粒(h) | sc-414330-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
VSTM2LCRISPR激活质粒(h2) | sc-414330-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
VSTM2L(V-set and transmembrane domain containing 2 like)编码一种膜相关蛋白,含有 V-set 免疫球蛋白样结构域,在神经组织中富集,并被认为参与细胞—细胞通信与细胞外信号传导。已有的表达谱报道与功能研究将 VSTM2L 与神经元分化及突触相关过程联系起来,提示其可能在调控神经发育程序和神经网络活动中发挥作用。作为一种与细胞表面/分泌相关的因子,VSTM2L 常被用于研究调控细胞间信号传递、受体介导线索下游的转录调控以及组织特异性基因表达的通路。VSTM2L 表达失调也被作为神经系统与神经精神疾病相关研究背景中的分子特征之一,并出现在更广泛的脑相关转录特征研究中。
VSTM2L CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性VSTM2L的表达。
VSTM2L CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的VSTM2L基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于VSTM2L转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性VSTM2L表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的VSTM2L位点,并能够研究内源性位点上依赖于VSTM2L的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在VSTM2L表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟VSTM2L通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。