Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
VAP-A Antibody (4C12): sc-293278. Western blot analysis of VAP-A expression in human placenta tissue extract.
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VAP-A双切口酶质粒(h): sc-403093-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- VAP-A 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- VAP-A双切酶质粒（h）和VAP-A双切酶质粒（h2）编码针对VAPA的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：VAP-A: sc-293278，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
VAP-A双切口酶质粒(h) | sc-403093-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
VAP-A双切口酶质粒(h2) | sc-403093-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
VAPA 编码 VAP-A，这是一种定位于内质网的尾锚定膜蛋白，负责组织内质网与多种细胞器之间的膜接触位点。VAP-A 通过其 MSP 结构域与含 FFAT 基序的蛋白相互作用，协调脂质转运、磷脂酰肌醇代谢、囊泡运输以及内质网稳态，并对自噬、应激信号等过程产生下游影响。由 VAP-A 依赖的内质网接触网络会影响胆固醇和鞘脂的分布，并支持分泌通路功能，因此 VAPA 的扰动与神经退行性病变、代谢失衡以及病原体复制研究中相关的细胞表型相联系。作为细胞器间连接处的支架蛋白，VAP-A 常被用于探究生理与应激条件下细胞器串扰、脂质通量和蛋白稳态调控的机制。
VAP-A 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 VAPA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对VAPA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏VAPA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了VAPA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。