Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
V-ATPase B2 Antibody (D-11): sc-166045. Western blot analysis of V-ATPase B2 expression in non-transfected 293T: sc-117752 (A), mouse V-ATPase B2 transfected 293T: sc-124517 (B) and U-87 MG (C) whole cell lysates.
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V-ATPase B2双切口酶质粒(h): sc-401896-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- V-ATPase B2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- V-ATPase B2双切酶质粒（h）和V-ATPase B2双切酶质粒（h2）编码针对ATP6V1B2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：V-ATPase B2: sc-166045，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
V-ATPase B2双切口酶质粒(h) | sc-401896-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
V-ATPase B2双切口酶质粒(h2) | sc-401896-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ATP6V1B2 编码液泡型 H⁺-ATP 酶（V-ATPase）的 B2 亚基。V-ATPase 是由多亚基组成的质子泵，可将 ATP 水解与细胞器腔内酸化相偶联。V-ATPase 活性对内体和溶酶体成熟、受体介导的内吞、自噬-溶酶体通量，以及分泌途径与内溶酶体途径中的蛋白分选至关重要。通过调控腔内 pH，V-ATPase 还会影响营养感知与 mTORC1 相关的溶酶体信号传导，并参与膜运输与抗原加工。V-ATPase 功能失调及内溶酶体 pH 稳态紊乱在神经生物学和细胞应激反应中被广泛认为具有重要作用，因此 ATP6V1B2 可作为研究酸化依赖过程机制的一个靶点。
V-ATPase B2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ATP6V1B2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATP6V1B2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ATP6V1B2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ATP6V1B2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。