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USP34慢病毒激活颗粒(m) | sc-421760-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
Usp34 编码去泛素化酶 USP34,这是一种泛素特异性蛋白酶,能够编辑多聚泛素链,从而调控蛋白稳定性和信号传导强度。研究表明,USP34 与多条关键通路的调控有关,包括 Wnt/β-catenin 信号通路以及其他依赖泛素的过程,这些过程会影响转录程序、细胞周期进程和细胞应激反应。通过对蛋白质稳态与信号转导的影响,USP34 活性异常常在发育表型以及与疾病相关的生长与分化通路失调等背景中受到关注。小鼠 USP34 为研究正常生理与疾病相关细胞状态下保守的去泛素化机制提供了一个在遗传学上易于操作的体系。
USP34 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Usp34 表达。
USP34 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Usp34转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性USP34表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Usp34 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。