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USP32慢病毒激活颗粒(m) | sc-433591-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
小鼠 Usp32 编码 USP32,这是一种去泛素化酶,能够从底物蛋白上移除泛素,从而调控其稳定性、运输过程及信号输出。通过调节依赖泛素的蛋白质稳态(proteostasis),USP32 与内体分选、蛋白质质量控制以及应激响应信号通路等细胞过程相关,这些过程共同塑造细胞生长与存活。多种生物学背景下,去泛素化动力学的改变与炎症及致癌信号的失调有关,因此 Usp32 是研究泛素通路调控机制的一个重要节点。在小鼠体系中,解析 USP32 的功能有助于理解去泛素化如何在发育、免疫以及疾病模型表型中重塑通路活性。
USP32 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Usp32 表达。
USP32 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Usp32转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性USP32表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Usp32 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。