Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
USP14 Antibody (A-1): sc-393872. Western blot analysis of USP14 expression in HeLa (A), MOLT-4 (B), U-251-MG (C), SK-OV-3 (D) and HCT-116 (E) whole cell lysates.
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USP14双切口酶质粒(h): sc-403167-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- USP14 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- USP14双切酶质粒（h）和USP14双切酶质粒（h2）编码针对USP14的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：USP14: sc-398009，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
USP14双切口酶质粒(h) | sc-403167-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
USP14双切口酶质粒(h2) | sc-403167-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
USP14 编码一种泛素特异性蛋白酶，可与 26S 蛋白酶体结合，并对底物上的泛素链进行编辑，从而在人体细胞中调控蛋白酶体降解过程及泛素稳态。USP14 通过从已连接泛素的蛋白质上修剪泛素，影响蛋白质质量控制、细胞应激反应，以及与蛋白稳态相关的信号通路，其中包括影响细胞周期进程和细胞凋亡的过程。USP14 活性异常常在蛋白酶体功能失调与异常泛素信号的研究背景下被探讨，而这些机制在肿瘤生物学和神经退行性疾病中经常被牵涉。作为一种与蛋白酶体相关的去泛素化酶，USP14 也有助于研究泛素动力学如何塑造抗原加工以及更广泛的免疫相关蛋白周转。
USP14 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 USP14 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对USP14内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏USP14的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了USP14基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。