Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Usherin Antibody (G-6): sc-515555. Western blot analysis of Usherin expression in human bladder (A) and mouse bladder (B) tissue extracts.
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Usherin CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-423630
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Usherin CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Usherin基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Usherin: sc-515555，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Usherin CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-423630 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Ush2a 编码 usherin（乌舍蛋白），这是一种与细胞外基质相关的大型跨膜蛋白，富集于感觉上皮的纤毛周膜复合体（periciliary membrane complex）。在该位置，usherin 有助于维持机械感受结构并支持细胞的长期完整性。在小鼠中，usherin 通过协调参与细胞黏附、纤毛运输以及细胞骨架耦联的蛋白复合体，促进静纤毛（stereocilia）的组织与光感受器的维持。USH2A 的功能受损与 II 型 Usher 综合征和视网膜色素变性密切相关，提示该基因参与调控依赖纤毛的信号通路以及感觉神经元稳态。因此，Ush2a 功能缺失模型常用于在视网膜和内耳背景下研究纤毛运输、细胞外支架组装以及与退行性变相关的应激反应。
Usherin CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Ush2a基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Ush2a基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Ush2a开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Usherin蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Ush2a缺失的细胞模型，用于Usherin信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Usherin 功能至关重要的 Ush2a 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Ush2a 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Usherin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Usherin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Ush2a 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Usherin HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Usherin HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Ush2a同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Ush2a靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。