
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
UNC5H3CRISPR激活质粒(h) | sc-403782-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
UNC5C 编码人类网膜蛋白(netrin)受体 UNC5H3。UNC5H3 是一种依赖性受体,介导趋化排斥性的导向线索,并参与轴突寻径、神经元迁移和突触组织。通过与 netrin-1 结合及其下游信号传导,UNC5H3 影响细胞骨架动态、细胞黏附以及对凋亡的易感性,整合多条塑造组织结构与神经回路形成的通路输入。UNC5C 活性与表达的改变与神经发育相关表型有关,并与癌症生物学及神经退行性疾病背景下涉及的细胞运动程序失调相关。作为细胞表面导向受体,UNC5H3 也适用于研究受体转运、配体依赖性信号以及情境特异性的存活信号。
UNC5H3 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性UNC5C的表达。
UNC5H3 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的UNC5C基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于UNC5C转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性UNC5H3表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的UNC5C位点,并能够研究内源性位点上依赖于UNC5H3的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在UNC5C表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟UNC5H3通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。