非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
UBE2F双切口酶质粒(m): sc-426826-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- UBE2F 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- UBE2F双切酶质粒（m）和UBE2F双切酶质粒（m2）编码针对Ube2f的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：UBE2F: sc-398668，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
UBE2F双切口酶质粒(m) | sc-426826-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
UBE2F双切口酶质粒(m2) | sc-426826-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Ube2f 基因编码 UBE2F，这是一种 E2 连接酶，可通过将 NEDD8 转移至 cullin-RING 连接酶（CRL）来支持 neddylation（NEDD8 化），并且与 CUL5–RBX2 轴具有很强的关联。通过该通路，UBE2F 参与一种类泛素修饰过程，从而精细调控底物识别与周转，进而影响蛋白质稳态、细胞周期进程以及应激适应性信号传导。扰动 UBE2F 依赖的 NEDD8 化会改变 CRL 活性及其下游的转录与凋亡程序，使 Ube2f 成为研究蛋白质稳态失调的一个重要节点，尤其适用于肿瘤相关与神经生物学背景。在小鼠模型中，研究者因此常常以 Ube2f 为切入点，将 NEDD8 通路动力学与信号强度变化及选择性蛋白降解联系起来进行研究。
UBE2F 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Ube2f 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ube2f内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Ube2f的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Ube2f基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。