非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
UBE2F 抗体 (C-11): sc-398668. Jurkat (A) 和 RAW 264. 7 (B) 全细胞裂解液及大鼠睾丸组织提取物 (C) 中 UBE2F 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
UBE2F双切口酶质粒(h): sc-406582-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- UBE2F 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- UBE2F双切酶质粒（h）和UBE2F双切酶质粒（h2）编码针对UBE2F的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：UBE2F: sc-398668，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
UBE2F双切口酶质粒(h) | sc-406582-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
UBE2F双切口酶质粒(h2) | sc-406582-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 UBE2F 编码一种 E2 结合酶，负责将 NEDD8 传递给 cullin 底物，从而支持 cullin–RING 连接酶（CRL）的组装与调控，并维持下游依赖泛素的蛋白质稳态。通过塑造特定 cullin 的 NEDD8 化状态，UBE2F 影响细胞周期进程、应激反应以及 DNA 损伤信号通路中关键调控因子的周转，进而影响转录程序和细胞内稳态。泛素–蛋白酶体与 NEDD8 化通路的失调常与致癌转化及应激耐受改变相关，因此 UBE2F 是研究蛋白质质量控制与信号串扰机制的一个重要节点。对 UBE2F 进行功能解析有助于阐明：在人类细胞中，选择性 cullin NEDD8 化如何偏置底物识别并改变蛋白水解输出。
UBE2F 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 UBE2F 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对UBE2F内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏UBE2F的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了UBE2F基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。