Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
UBC9 Antibody (C-12): sc-271057. Near-infrared western blot analysis of UBC9 expression in Jurkat (A), HeLa (B), F9 (C), TK-1 (D) and 804G (E) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgGκ BP-CFL 680: sc-516180.
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UBC9双切口酶质粒(h): sc-400859-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- UBC9 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- UBC9双切酶质粒（h）和UBC9双切酶质粒（h2）编码针对UBE2I的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：UBC9: sc-271057，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
UBC9双切口酶质粒(h) | sc-400859-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UBC9双切口酶质粒(h2) | sc-400859-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBE2I 编码 UBC9，这是唯一的 E2 类 SUMO 连接酶，负责将 SUMO 转移到底物蛋白上，从而调控蛋白稳定性、亚细胞定位以及大分子相互作用。通过 SUMO 化（SUMOylation），UBC9 影响 DNA 损伤信号传导与修复、细胞周期进程、染色质组织、转录程序以及核质转运，将应激响应通路与蛋白质稳态调控整合在一起。UBC9 依赖的 SUMO 化受扰动与基因组维护失衡和转录控制改变有关，而 SUMO 通路活性异常也常见于肿瘤生物学以及神经退行性疾病相关的细胞应激表型中。作为 SUMO 级联反应的核心节点，UBC9 是解析 SUMO 依赖性关键底物调控及通路串扰的理想切入点。
UBC9 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 UBE2I 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对UBE2I内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏UBE2I的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了UBE2I基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。