非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
UBC12 抗体 (D-4) HRP: sc-390064 HRP. RAW 264. 7 (A), MCF7 (B), PC-12 (C), Jurkat (D), NIH/3T3 (E) 和 C6 (F) 全细胞裂解液中 UBC12 表达的直接 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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UBC12 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-423575
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- UBC12 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在UBC12基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：UBC12: sc-390064，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
UBC12 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-423575 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Ube2m 编码 UBC12，这是一种 E2 连接酶，可将 NEDD8 转移到 cullin 骨架蛋白上，从而促使 cullin–RING 型泛素连接酶（CRLs）被激活，并对蛋白质稳态进行广泛调控。通过调节 CRL 依赖的泛素化过程，UBC12 通过影响关键调控蛋白的周转，进而作用于细胞周期进程、DNA 损伤应答、信号转导以及应激适应。NEDD8 化（neddylation）的扰动会破坏蛋白质稳态与检查点控制，因此 Ube2m/UBC12 的功能与癌症生物学、神经生物学和炎症信号等领域常被研究的通路相关。在小鼠体系中，Ube2m 的功能缺失研究有助于对泛素样修饰网络及其对组织发育和疾病相关表型的贡献进行机制层面的解析。
UBC12 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Ube2m基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Ube2m基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Ube2m开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使UBC12蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Ube2m缺失的细胞模型，用于UBC12信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 UBC12 功能至关重要的 Ube2m 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Ube2m 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 UBC12 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 UBC12 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Ube2m 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 UBC12 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 UBC12 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Ube2m同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Ube2m靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。