Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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U2AF65双切口酶质粒(m): sc-423572-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- U2AF65 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- U2AF65双切酶质粒（m）和U2AF65双切酶质粒（m2）编码针对U2af2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：U2AF65: sc-53942，通过WB, IF或者IHC分析
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
U2AF65双切口酶质粒(m) | sc-423572-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
U2af2 编码小鼠 U2AF65 蛋白，这是一种必需的 RNA 结合型剪接因子，能够识别 3′ 剪接位点处的多嘧啶区段，并在剪接体早期组装过程中帮助招募 U2 snRNP。通过其 RNA 识别基序以及与 U2AF35 和 SF1 的相互作用，U2AF65 协调外显子定义与可变剪接决策，从而在多条信号传导与细胞周期通路中塑造转录本同工型的输出。干扰 U2AF65 依赖的剪接会改变 mRNA 成熟、核输出以及蛋白质组构成，使 U2af2 成为研究 RNA 加工保真性的关键节点。剪接程序失调与剪接体因子失衡被广泛认为与血液系统及实体肿瘤生物学，以及神经发育与神经退行性疾病机制相关，因此可利用 U2af2 模型来探究与疾病相关的剪接网络。
U2AF65 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 U2af2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对U2af2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏U2af2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了U2af2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。