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twist双切口酶质粒(h) | sc-400108-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
twist双切口酶质粒(h2) | sc-400108-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TWIST1 编码 twist 蛋白,这是一种基础螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子,可通过对 EMT 程序进行情境依赖性的转录调控,参与调节胚胎形态发生、谱系命运决定以及细胞状态可塑性。它会调控细胞迁移、黏附和细胞外基质重塑等相关通路,并与 TGF-β、WNT/β-连环蛋白以及 MAPK 信号通路存在串扰。TWIST1 活性失调与分化异常和侵袭性表型相关;其生殖系或体细胞层面的扰动也与颅颌面发育障碍和癌症进展有关。作为间质性特征的主调控因子,twist 常被用于发育、类纤维化重塑以及肿瘤细胞可塑性等模型研究。
twist 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TWIST1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TWIST1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TWIST1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TWIST1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。