TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-423540
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在TTF/Transcription Termination Factor/TTF1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：TTF/Transcription Termination Factor/TTF1: sc-398968，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-423540 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Ttf1（TTF1，转录终止因子1）是一种序列特异性的 DNA 结合蛋白，在核糖体 DNA（rDNA）重复序列中发挥转录终止因子和复制叉屏障因子的作用。在小鼠细胞中，TTF1 有助于组织核仁染色质，协调 RNA 聚合酶 I 的转录与 rRNA 加工，并通过调控 rDNA 复制–转录冲突来维持基因组稳定性。通过这些作用，TTF1 促进核仁稳态与核糖体生物发生，而这些过程与细胞增殖和应激反应密切相关。rDNA 转录调控与核仁功能的失衡常与致癌性生长程序及更广泛的基因组不稳定表型有关，因此 Ttf1 是机制研究中的重要靶点。
TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Ttf1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Ttf1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Ttf1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使TTF/Transcription Termination Factor/TTF1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Ttf1缺失的细胞模型，用于TTF/Transcription Termination Factor/TTF1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 功能至关重要的 Ttf1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Ttf1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Ttf1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Ttf1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Ttf1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。