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TROP-2慢病毒激活颗粒(h) | sc-402046-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
TACSTD2 编码人滋养层细胞表面抗原 2(TROP-2),这是一种 I 型跨膜糖蛋白,参与上皮细胞身份维持、细胞黏附以及增殖相关信号传导。TROP-2 可调节细胞内钙离子通量,并与 MAPK/ERK 和 PI3K–AKT 等通路相关的活动发生相互作用,从而影响细胞周期进程、生存与迁移等程序。TACSTD2 表达异常常与上皮肿瘤生物学特征及转移性表型相关,而其致病性变异也与上皮屏障功能障碍有关。作为兼具表面抗原属性与信号传导能力的分子,TROP-2 是解析上皮状态的转录调控及疾病相关模型中下游通路重编程的一个重要节点。
TROP-2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 TACSTD2 表达。
TROP-2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在TACSTD2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性TROP-2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 TACSTD2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。