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TRIM8慢病毒激活颗粒(m) | sc-429995-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
Trim8 编码 TRIM8 蛋白,后者属于 TRIM 家族的 E3 泛素连接酶,可通过泛素化调控蛋白稳定性与信号输出,从而影响与先天免疫及细胞应激反应相关的转录程序。TRIM8 调节由细胞因子驱动的通路,包括 NF-κB 和干扰素相关信号;并被认为可在特定情境下调控 p53、STAT 等关键调控因子的活性与周转。在小鼠体系中,TRIM8 因其在神经发育、炎症以及细胞稳态中的作用而受到研究;其表达改变可重塑免疫信号与生长控制网络。这些特性使 Trim8 成为解析与疾病相关模型中、依赖泛素的信号回路调控机制的一个重要节点。
TRIM8 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Trim8 表达。
TRIM8 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Trim8转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性TRIM8表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Trim8 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。