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TRIM26CRISPR激活质粒(h) | sc-404871-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
TRIM26(三联基序含量蛋白26,tripartite motif containing 26)是TRIM家族的一种RING型E3泛素连接酶,可通过依赖泛素化的机制调控蛋白稳定性与信号输出。在人类细胞中,TRIM26与先天免疫和炎症信号的调控有关,包括对干扰素相关通路及其下游转录程序的调节。通过影响信号中间体和转录调控因子的周转与活性,TRIM26能够影响抗病毒应答、细胞应激适应以及免疫稳态。TRIM26表达或活性失调已在免疫介导性疾病与癌症相关信号网络的背景下受到研究;在这些情境中,泛素–蛋白酶体系统的扰动会重塑基因表达与细胞状态转换。
TRIM26 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性TRIM26的表达。
TRIM26 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的TRIM26基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于TRIM26转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性TRIM26表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的TRIM26位点,并能够研究内源性位点上依赖于TRIM26的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在TRIM26表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟TRIM26通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。