Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
TRIM10 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-422691
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- TRIM10 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在TRIM10基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
TRIM10 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-422691 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
小鼠 TRIM10（Trim10）编码一种含三联基序（tripartite motif, TRIM）的 E3 泛素连接酶，参与依赖泛素的蛋白稳定性调控以及信号复合体周转。TRIM 家族蛋白通常通过调节泛素化与蛋白质稳态（proteostasis），参与先天免疫信号、应激反应，以及与细胞骨架或分化相关的过程调控。在造血相关背景中，TRIM 蛋白常与谱系承诺和成熟程序相关联，因此 Trim10 对于研究红系相关调控网络以及更广泛的免疫细胞生物学具有意义。泛素通路活性失调是炎症性与血液系统疾病机制中的常见特征，这也支持在相关小鼠模型中通过扰动 Trim10 来探查通路依赖性。
TRIM10 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Trim10基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Trim10基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Trim10开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使TRIM10蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Trim10缺失的细胞模型，用于TRIM10信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 TRIM10 功能至关重要的 Trim10 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Trim10 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 TRIM10 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 TRIM10 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Trim10 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 TRIM10 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 TRIM10 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Trim10同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Trim10靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。