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TREX-1双切口酶质粒(m) | sc-423502-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
TREX-1双切口酶质粒(m2) | sc-423502-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Trex1 基因编码 TREX-1,这是一种 3′→5′ 方向的 DNA 外切酶,能够降解细胞质中以及异常的 DNA 物种,从而防止先天免疫感知被不恰当地激活。TREX-1 位于 DNA 复制/修复与核酸清除的交汇处,因而可限制 cGAS–STING–TBK1 信号通路及其下游 I 型干扰素转录程序。TREX-1 的缺失或功能障碍与免疫刺激性 DNA 的积累以及干扰素刺激基因的慢性表达相关,将 Trex1 的生物学功能与炎症性及类自身免疫表型联系起来。Trex1 也常用于研究基因组稳定性、DNA 损伤应答,以及细胞质 DNA 监视失调在免疫组织与非免疫组织中的后果。
TREX-1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Trex1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Trex1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Trex1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Trex1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。