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TRAP150双切口酶质粒(m) | sc-432980-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
TRAP150双切口酶质粒(m2) | sc-432980-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Thrap3 编码 TRAP150,这是一种核内 RNA 结合并与转录相关的因子,被认为参与将转录与前体 mRNA(pre-mRNA)剪接及 3′ 端加工过程进行耦联。TRAP150 参与 mRNP 的成熟,并与剪接体及转录机器的组分相互作用,从而影响可变剪接选择与基因表达程序。这些功能使 Thrap3 与细胞周期进程以及应激反应型转录网络的调控相关,而这些网络在肿瘤生物学中常常发生紊乱。与 TRAP150 活性相关的剪接与转录协同的改变,使该基因成为研究致癌性基因表达机制以及 RNA 加工缺陷的重要对象。
TRAP150 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Thrap3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Thrap3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Thrap3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Thrap3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。