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TRAP-1双切口酶质粒(h) | sc-402963-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
TGFBRAP1 编码 TRAP-1,这是一种细胞内衔接蛋白,与转化生长因子-β(TGF-β)受体复合物相关,支持受体转运、信号复合物组装以及下游通路调控。TRAP-1 通过影响 SMAD 依赖的转录反应与 MAPK 等其他应激响应通路之间的平衡与串话,参与调节细胞增殖、分化以及细胞外基质稳态。TGF-β 通路调控异常与纤维化、免疫调节以及癌症相关的上皮–间质可塑性变化和微环境重塑有关,因此 TGFBRAP1 是开展机制研究的一个有价值节点。人源 TRAP-1 的功能研究也有助于解析受体相关支架蛋白如何在特定情境下微调信号强度与持续时间。
TRAP-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TGFBRAP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TGFBRAP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TGFBRAP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TGFBRAP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。