Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
TR4 Antibody (D-5): sc-365895. Western blot analysis of TR4 expression in C2C12 (A), A-673 (B) and Jurkat (C) whole cell lysates.
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TR4 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-423490
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- TR4 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在TR4基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：TR4: sc-365895，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
TR4 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-423490 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Nr2c2 编码孤儿核受体 TR4（睾丸受体 4），这是一种不依赖配体的转录因子，可结合激素反应元件，从而调控参与发育、代谢以及细胞命运决定的基因程序。在小鼠系统中，TR4 与核受体信号网络整合，并在生殖、神经及免疫相关背景下影响脂质和葡萄糖稳态、线粒体功能以及分化过程的转录调控。由于其广泛的转录效应，TR4 的活性被认为可通过调节炎症信号与细胞应激反应而发挥作用，使 Nr2c2 成为研究通路串扰的一个有用节点。TR4 相关基因表达失调已在代谢功能障碍、神经生物学及肿瘤样表型的模型中被研究，支持其用于机制研究的相关性，但不暗示任何临床结局。
TR4 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Nr2c2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Nr2c2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Nr2c2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使TR4蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Nr2c2缺失的细胞模型，用于TR4信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 TR4 功能至关重要的 Nr2c2 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Nr2c2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 TR4 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 TR4 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Nr2c2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 TR4 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 TR4 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Nr2c2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Nr2c2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。