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Tom70双切口酶质粒(h) | sc-402022-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Tom70双切口酶质粒(h2) | sc-402022-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TOMM70 编码 Tom70,这是一种线粒体外膜的蛋白导入受体,能够识别细胞质中的前体蛋白以及与伴侣蛋白结合的疏水性载体蛋白,并协调将其递送至 TOM 复合体,从而完成向线粒体内的转运。通过支持呼吸链组分的生物发生与线粒体蛋白质稳态维持,Tom70 有助于维持氧化磷酸化能力、细胞器动态以及细胞对压力的适应。TOMM70 功能异常已在线粒体功能障碍和神经退行性疾病等背景中得到研究;此外,它还可通过调控与 MAVS 依赖性抗病毒通路相互作用的导入因子的可用性与组织方式,影响线粒体处的先天免疫信号传导。这些特性使 TOMM70 成为研究线粒体蛋白导入、代谢重塑以及与复杂疾病表型相关的应激反应调控网络的有用靶点。
Tom70 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TOMM70 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TOMM70内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TOMM70的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TOMM70基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。