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TOK-1双切口酶质粒(h) | sc-406452-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
BCCIP(BRCA2 与 CDKN1A 相互作用蛋白)编码一种保守因子,通过与 BRCA2 和 p21/CDKN1A 的相互作用维持基因组稳定性,从而将 DNA 修复与细胞周期调控联系起来。BCCIP 参与同源重组、复制压力应答和检查点信号传导,并被认为在 S 期维持染色体完整性方面发挥作用。BCCIP 表达或功能的改变与 DNA 损伤应答缺陷以及基因组不稳定性增加相关——这些都是肿瘤生物学中常见的特征。因此,BCCIP 是用于解析 DNA 修复通路、增殖调控以及在人类细胞中将 DNA 复制与检查点执行相耦联机制的有用靶点。
TOK-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 BCCIP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BCCIP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏BCCIP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了BCCIP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。