Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
TNFβ Antibody (E-6): sc-28345. Western blot analysis of TNFβ expression in non-transfected: sc-117752 (A), human TNFβ transfected: sc-113691 (B) and human TNFβ transfected: sc-159758 (C) 293T whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgG1 BP-HRP: sc-525408.
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TNFβ双切口酶质粒(h): sc-403005-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- TNFβ 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- TNFβ双切酶质粒（h）和TNFβ双切酶质粒（h2）编码针对LTA的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：TNFβ: sc-28345，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
TNFβ双切口酶质粒(h) | sc-403005-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
TNFβ双切口酶质粒(h2) | sc-403005-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 LTA 基因编码淋巴毒素-α（lymphotoxin-α，TNFβ），这是一种 TNF 超家族细胞因子，主要由活化的淋巴细胞产生。它可通过 TNFR1/TNFR2 传递信号，并且在与 LTβ 形成的膜相关复合物中，还可通过 LTβR 介导信号。TNFβ 可激活经典的 NF-κB 与 MAPK 通路，从而调控炎症相关基因表达、细胞存活与凋亡，以及淋巴组织微环境的组织结构。它参与免疫细胞与基质细胞的相互通讯、内皮细胞激活，以及塑造适应性免疫反应的细胞因子网络。LTA 信号失调与慢性炎症和免疫介导性病理过程有关，也与肿瘤微环境中的肿瘤–免疫相互作用相关。
TNFβ 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 LTA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LTA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏LTA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了LTA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。