Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
TNFβ CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-421477
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- TNFβ CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在TNFβ基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：TNFβ: sc-28345，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
TNFβ CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-421477 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Lta 编码肿瘤坏死因子β（TNFβ，又称淋巴毒素-α），属于 TNF 超家族细胞因子，主要由活化的淋巴细胞产生，可通过 TNFR1/TNFR2 传递信号，并参与淋巴器官发生以及炎症相关的细胞间串扰。TNFβ 可激活经典的 NF-κB 和 MAPK 信号通路，调控白细胞的存活、细胞因子网络以及黏附分子表达，从而影响免疫细胞迁移与组织重塑。在小鼠系统中，Lta 的功能与次级淋巴结构的组织建构以及适应性免疫应答的协调密切相关。TNFβ 信号失衡常在慢性炎症、自身免疫以及肿瘤相关免疫微环境等模型中被研究，这些情境中基质细胞与免疫细胞的相互作用往往发生改变。
TNFβ CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Lta基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Lta基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Lta开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使TNFβ蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Lta缺失的细胞模型，用于TNFβ信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 TNFβ 功能至关重要的 Lta 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Lta 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 TNFβ CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 TNFβ CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Lta 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 TNFβ HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 TNFβ HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Lta同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Lta靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。