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TMTC3双切口酶质粒(h) | sc-409056-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
TMTC3 编码一种定位于内质网的跨膜四联重复(TPR)蛋白,参与蛋白质质量控制与糖蛋白成熟过程,包括对部分底物的 O-甘露糖基化进行调控。通过在内质网蛋白稳态(proteostasis)中的作用,TMTC3 影响膜蛋白和分泌蛋白的折叠、转运与稳定性,并与内质网应激信号通路及未折叠蛋白反应(UPR)的调节等过程相交汇。遗传学与功能研究已将 TMTC3 的异常与神经发育相关表型以及与蛋白加工受损相一致的细胞稳态改变联系起来。因此,TMTC3 常被用于研究神经元发育模型、黏附与信号受体的成熟过程,以及与先天性和神经系统疾病机制相关的内质网通路。
TMTC3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TMTC3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TMTC3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TMTC3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TMTC3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。