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TMEM125慢病毒激活颗粒(h) | sc-414318-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
TMEM125 编码一种多跨膜蛋白,目前功能注释较为有限。据报道其定位于细胞内膜系统,并被认为参与囊泡运输与膜相关信号传导的调控。作为一种潜在的膜组织/组装因子,TMEM125 常在细胞器稳态、蛋白分选以及影响细胞增殖与存活的细胞应激反应等研究背景下被关注。类似 TMEM125 这类跨膜调控因子的表达变化,也常在转录组数据集中被用于探索其与致癌通路、免疫信号以及代谢适应之间的关联。这些特点使 TMEM125 成为将膜动力学与通路调控及人类细胞中与疾病相关表型联系起来的机制研究的有用靶点。
TMEM125 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 TMEM125 表达。
TMEM125 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在TMEM125转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性TMEM125表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 TMEM125 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。