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TM6SF2CRISPR激活质粒(h) | sc-408066-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
TM6SF2CRISPR激活质粒(h2) | sc-408066-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 TM6SF2(跨膜 6 超家族成员 2)编码一种与内质网相关的多跨膜蛋白,参与肝脏脂质处理以及极低密度脂蛋白(VLDL)的分泌。TM6SF2 可调控富含甘油三酯的脂蛋白装配,并影响细胞内甘油三酯的积累,因此与调节脂滴动态和维持内质网稳态的代谢通路相关。TM6SF2 的遗传变异及其表达改变与血脂异常和脂肪肝表型易感性相关,支持其在代谢性肝病研究中的重要性。作为肝细胞脂质通量的一个调控节点,TM6SF2 常在脂质代谢、炎症相关应激反应以及心代谢风险机制等研究背景中被重点考察。
TM6SF2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性TM6SF2的表达。
TM6SF2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的TM6SF2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于TM6SF2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性TM6SF2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的TM6SF2位点,并能够研究内源性位点上依赖于TM6SF2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在TM6SF2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟TM6SF2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。