TIS11DCRISPR激活质粒(h): sc-405406-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- TIS11D CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- TIS11D CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 TIS11D CRISPR 激活质粒 (h) 和 TIS11D CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 ZFP36L2 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：TIS11D: sc-365908，通过WB, IF或者IHC分析
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
TIS11DCRISPR激活质粒(h) | sc-405406-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
ZFP36L2 编码人源 RNA 结合蛋白 TIS11D，它属于 tristetraprolin（TTP）家族，可识别靶 mRNA 中富含 AU 的元件（AU-rich elements, ARE），并促进转录本去腺苷化与降解。通过转录后调控，TIS11D 调节参与淋巴细胞发育、细胞激活与分化的程序，并与炎症及应激反应信号网络整合，从而塑造基因表达的动态变化。ZFP36L2 活性异常与免疫稳态失衡及异常增殖相关，这通常源于对细胞因子与细胞周期相关转录本的失当调控，因而使其在免疫学与血液系统疾病研究中具有重要意义。作为 mRNA 稳定性的调控因子，TIS11D 提供了一个可操作的关键节点，便于研究 RNA 周转、转录组重塑以及谱系命运决定。
TIS11D CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ZFP36L2的表达。
TIS11D CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的ZFP36L2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于ZFP36L2转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性TIS11D表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的ZFP36L2位点，并能够研究内源性位点上依赖于TIS11D的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ZFP36L2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟TIS11D通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。