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TIP120A双切口酶质粒(h) | sc-402506-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
CAND1(TIP120A)编码一种 Cullin-RING 泛素连接酶(CRL)的调控因子,可与未发生 NEDD8 化(unneddylated)的 cullin 结合,并促进底物受体模块的交换,从而控制 CRL 的组装与重塑。通过这一作用,TIP120A 协调依赖泛素的蛋白质稳态(proteostasis),并影响细胞周期进程、DNA 复制压力应答,以及关键信号调控蛋白的信号依赖性降解。CRL 动态调控以及 NEDD8 化/去 NEDD8 化平衡的失衡与基因组不稳定性和生长控制异常相关,因此 CAND1 是癌症生物学中经常受扰动通路里的一个重要节点。TIP120A 的功能也常在依赖蛋白酶体的质量控制与应激适应背景下被研究,因为 CRL 对底物的选择会塑造细胞表型。
TIP120A 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CAND1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CAND1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CAND1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CAND1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。