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Tim17B双切口酶质粒(h) | sc-411441-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Tim17B双切口酶质粒(h2) | sc-411441-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TIMM17B 编码 Tim17B,它是线粒体内膜 TIM23 易位酶复合体的关键组成部分,负责将细胞核编码的蛋白质导入线粒体并插入内膜。通过维持线粒体蛋白稳态,Tim17B 有助于保持氧化磷酸化能力、线粒体膜电位,并维持基质与内膜中的蛋白质稳态。TIM23 复合体功能受扰会破坏能量代谢,并激活线粒体应激信号通路(如线粒体未折叠蛋白反应,mtUPR),使 TIMM17B 的生物学功能与更广泛的细胞适应程序相联系。作为线粒体蛋白导入因子,TIMM17B 常用于研究与癌细胞代谢以及神经退行性疾病相关的生物能量重编程和线粒体功能障碍/应激表型。
Tim17B 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TIMM17B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TIMM17B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TIMM17B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TIMM17B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。