Date published: 2026-7-21

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TIM-3双切口酶质粒(h): sc-416365-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • TIM-3 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • TIM-3双切酶质粒(h)和TIM-3双切酶质粒(h2)编码针对HAVCR2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:TIM-3: sc-517632,通过WB, IF或者IHC分析
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    TIM-3双切口酶质粒(h)

    sc-416365-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    TIM-3双切口酶质粒(h2)

    sc-416365-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    HAVCR2 编码人T细胞免疫球蛋白与黏蛋白结构域含量蛋白3(TIM-3)。TIM-3 是一种免疫调节受体,表达于活化T细胞、调节性T细胞、NK细胞以及髓系细胞群体。TIM-3 可与半乳糖凝集素-9(galectin-9)、磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine)、CEACAM1 和 HMGB1 等配体结合,从而调控T细胞受体信号传导、免疫突触功能、细胞因子产生,以及与耗竭和免疫耐受相关的细胞命运决策。通过与免疫检查点网络及炎症信号程序的串扰,TIM-3 在慢性免疫刺激背景下影响抗原呈递与效应反应。HAVCR2/TIM-3 活性的失调与肿瘤免疫学、慢性病毒感染以及自身免疫性炎症中的免疫稳态改变有关,因此是开展免疫调控机制研究的一个有价值节点。

    TIM-3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HAVCR2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HAVCR2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HAVCR2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HAVCR2基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。