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Thyroperoxidase双切口酶质粒(h) | sc-402102-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Thyroperoxidase双切口酶质粒(h2) | sc-402102-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 TPO 基因编码甲状腺过氧化物酶(thyroperoxidase,TPO),这是一种含血红素的膜结合糖蛋白,定位于甲状腺滤泡细胞的顶端表面,催化甲状腺激素生物合成所必需的关键碘化与偶联反应。TPO 通过氧化碘离子并促进甲状腺球蛋白上的碘化酪氨酸形成,将依赖氧化还原的酶促活性与甲状腺胶质界面的生激素加工过程整合在一起。TPO 的功能与碘离子处理及甲状腺球蛋白成熟通路密切相关,通过受调控的激素生成来维持内分泌稳态。TPO 活性失调或机体对 TPO 的免疫识别与甲状腺功能异常相关,并为研究甲状腺疾病的自身免疫与代谢特征提供了分子切入点。
Thyroperoxidase 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TPO 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TPO内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TPO的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TPO基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。