
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
THOC1CRISPR激活质粒(h) | sc-403390-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
THOC1 编码 THO/TREX 复合体的核心亚基之一。该复合体将 RNA 聚合酶 II 介导的转录与 pre-mRNA 加工以及通过核孔的 mRNA 输出相耦联。通过协调信使核糖核蛋白(mRNP)的组装,THOC1 维持转录组完整性、限制 R-loop 的累积,并在复制及 DNA 损伤应答过程中促进基因组稳定性。THO/TREX 组分的扰动已被关联到转录相关的基因组不稳定性以及表达程序的改变,这些现象常在癌症生物学及其他增殖或应激反应相关背景中被研究。因此,人源 THOC1 常被用作研究“转录–输出耦联”、RNA 监视以及染色质相关 RNA 加工机制的切入点。
THOC1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性THOC1的表达。
THOC1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的THOC1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于THOC1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性THOC1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的THOC1位点,并能够研究内源性位点上依赖于THOC1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在THOC1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟THOC1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。