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TGase2双切口酶质粒(m) | sc-423375-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Tgm2 编码转谷氨酰胺酶 2(TGase2),这是一种多功能的 Ca²⁺ 依赖性酶,可催化蛋白质交联、脱酰胺以及多胺化反应,从而重塑细胞外基质并稳定蛋白复合体。TGase2 还可作为结合 GTP 的信号蛋白发挥作用,并参与整合素介导的黏附、细胞骨架动力学,以及对 NF-κB 和 TGF-β 相关应激与炎症反应的调控。通过这些活动,TGase2 影响细胞凋亡、自噬、创伤修复和纤维化重塑;TGase2 表达或活性异常已与炎症性疾病模型、组织纤维化、神经退行性变以及肿瘤微环境生物学相关。因此,Tgm2 被广泛用作研究小鼠体系中基质生物学、免疫信号与细胞应激适应的关键节点。
TGase2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Tgm2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Tgm2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Tgm2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Tgm2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。