TF慢病毒激活颗粒(m2): sc-420268-LAC-2
- 针对种属：mouse
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- TF 慢病毒激活颗粒（m2）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- TF慢病毒激活颗粒(m2)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 TF 慢病毒激活质粒 (m2) 和 TF 慢病毒激活质粒 (m22) 编码的 gRNA 靶向 F3 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因激活效率可以用抗体：TF Antibody (H-9): sc-374441，通过WB、IF或IHC分析
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
TF慢病毒激活颗粒(m2) | sc-420268-LAC-2 | 200 µl | CNY3422.00 |
小鼠F3基因编码组织因子（TF），这是一种跨膜蛋白，作为外源性凝血级联反应的起始因子，通过结合凝血因子VII/VIIa促进下游凝血因子X的激活并生成凝血酶。除止血功能外，TF信号还可与依赖蛋白酶激活受体（PAR）的通路发生交互作用，从而在内皮细胞和髓系细胞等背景中影响炎症反应、血管重塑以及细胞迁移。F3/TF表达失调与病理性血栓形成、脓毒症相关凝血障碍以及肿瘤相关促凝活性有关，因此被认为是连接凝血与先天免疫反应的关键节点。对小鼠F3进行基因编辑有助于开展机制研究，例如凝血因子复合体的组装、TF驱动的PAR信号传导，并用于在体模型中评估血栓炎症表型及血管损伤反应。
TF 慢病毒激活颗粒（m2）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 F3 表达。
TF 慢病毒激活颗粒（m2）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在F3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性TF表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 F3 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。