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TF双切口酶质粒(h) | sc-401060-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
TF双切口酶质粒(h2) | sc-401060-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 F3 基因编码组织因子(TF)。TF 是一种跨膜蛋白,是外源性凝血级联反应的启动因子,可与凝血因子 VII/VIIa 形成复合物,从而触发下游凝血酶生成与纤维蛋白形成。除止血之外,TF 依赖的蛋白酶信号传导还与 PAR 的激活、炎症反应、血管生成以及内皮细胞–单核细胞相互作用相交织,共同塑造血管生物学。F3 的表达受细胞因子与应激信号严格调控,并常在血栓形成、动脉粥样硬化、脓毒症相关凝血病以及与肿瘤微环境相关的促凝活性等研究背景中被重点考察。这些功能使 TF 成为解析凝血与先天免疫信号通路之间串扰的一个重要节点。
TF 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 F3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对F3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏F3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了F3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。