Date published: 2026-7-21

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TET2双切口酶质粒(m): sc-431916-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • TET2 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • TET2双切酶质粒(m)和TET2双切酶质粒(m2)编码针对Tet2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    TET2双切口酶质粒(m)

    sc-431916-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    TET2双切口酶质粒(m2)

    sc-431916-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    小鼠 Tet2 编码双加氧酶 TET2。TET2 是表观遗传重编程的关键调控因子,可催化 5-甲基胞嘧啶(5mC)氧化生成 5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)及其下游衍生物,从而塑造 DNA 去甲基化的动态过程。TET2 活性会影响染色质可及性以及转录程序,这些程序共同调控造血干/祖细胞的自我更新、谱系承诺与免疫细胞分化。通过与 DNA 甲基化维持机制及染色质修饰通路的整合,TET2 有助于协调增强子功能与细胞因子响应基因的表达。在体内模型和细胞系统中,Tet2 功能异常常被用于模拟与血液系统疾病及炎症性疾病机制相关的表观遗传调控失衡。

    TET2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Tet2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Tet2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Tet2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Tet2基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。