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TCP-1 ζ双切口酶质粒(h) | sc-403047-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
TCP-1 ζ双切口酶质粒(h2) | sc-403047-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CCT6A 编码人类 TRiC/CCT 伴侣蛋白复合体中的 TCP-1 ζ(zeta)亚基。TRiC/CCT 是一种依赖 ATP 的折叠机器,帮助多种细胞质蛋白完成成熟。TRiC/CCT 通过促进肌动蛋白、微管蛋白以及其他复杂多结构域底物的正确折叠来维持蛋白质稳态,从而影响细胞骨架组织、细胞周期进程和应激适应。通过影响关键信号与结构蛋白的稳定性及功能性组装,TCP-1 ζ 将伴侣蛋白介导的折叠与调控增殖和细胞稳态的通路联系起来。包括 CCT6A 在内的 TRiC/CCT 组分失调,已在蛋白质稳态失衡及异常生长表型等背景下被研究,这些表型与癌症和神经退行性疾病研究相关。
TCP-1 ζ 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CCT6A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CCT6A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CCT6A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CCT6A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。