
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
TCF-3双切口酶质粒(h) | sc-400821-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
TCF-3双切口酶质粒(h2) | sc-400821-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TCF7L1 编码转录因子 TCF-3,这是一种具有高迁移率族(HMG)DNA 结合结构域的蛋白,作为经典 Wnt/β-连环蛋白信号通路的关键核内效应分子发挥作用。TCF-3 将 Wnt 信号与共抑制子和共激活子复合体整合起来,调控染色质状态以及控制细胞命运决定、增殖与分化的转录程序,在干细胞和祖细胞生物学中尤为重要。通过调节 Wnt 靶基因表达,并与 MAPK 及表观遗传调控通路发生串扰,TCF-3 有助于设定谱系承诺的阈值并维持组织稳态。TCF7L1 活性失衡及 Wnt 信号动态改变与致癌性的转录重编程和发育表型相关,提示其在癌症机制研究和分化模型中具有重要意义。
TCF-3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TCF7L1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TCF7L1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TCF7L1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TCF7L1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。