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TC-PTP双切口酶质粒(m) | sc-422509-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Ptpn2 基因编码 T 细胞蛋白酪氨酸磷酸酶(TC-PTP),这是一种非受体型磷酸酶,可通过去磷酸化 JAK、STAT 等关键底物来减弱细胞因子与生长因子受体的信号传导。TC-PTP 通过调控 JAK/STAT 及相关免疫信号网络,帮助设定炎症反应、T 细胞激活和上皮稳态的阈值。Ptpn2 的活性还与胰岛素受体信号以及影响细胞代谢和增殖的应激反应通路发生交叉。遗传学与功能学研究表明,PTPN2/TC-PTP 信号的异常与自身免疫和炎症表型、与肿瘤相关的免疫逃逸情境以及代谢失衡有关,因此是开展机制研究的重要靶点。
TC-PTP 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Ptpn2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ptpn2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Ptpn2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Ptpn2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。