
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
TBX15CRISPR激活质粒(h) | sc-405994-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 TBX15 编码一种 T-box 家族转录因子,可调控发育模式建立程序和间充质谱系的特化,在骨骼与脂肪组织生物学中具有重要作用。TBX15 通过结合 T-box 基序并协调转录网络,影响染色质状态及下游基因表达程序,从而塑造细胞命运决定、分化与组织形态发生。TBX15 表达改变及其调控变异与脂肪分布和代谢表型相关;TBX15 活性失衡也常在发育异常以及与癌症相关的转录重编程背景中被研究。这些特征使 TBX15 成为解析谱系承诺的转录控制与组织特异性基因调控的一个有用节点。
TBX15 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性TBX15的表达。
TBX15 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的TBX15基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于TBX15转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性TBX15表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的TBX15位点,并能够研究内源性位点上依赖于TBX15的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在TBX15表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟TBX15通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。