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TBK1双切口酶质粒(h) | sc-401066-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
TBK1双切口酶质粒(h2) | sc-401066-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TBK1(TANK 结合激酶 1)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,通过磷酸化 IRF3/IRF7 等关键底物,将先天免疫与应激信号整合起来,从而在模式识别受体下游驱动 I 型干扰素反应。它也可通过包含 TANK、NAP1 和 SINTBAD 在内的适配蛋白复合物与 NF-κB 信号通路发生耦联,塑造炎症相关的转录程序。除免疫功能外,TBK1 还可通过磷酸化 optineurin 和 p62/SQSTM1 等自噬受体来调控选择性自噬与线粒体自噬(mitophagy),将病原体识别与细胞器质量控制联系起来。TBK1 的遗传或功能扰动与神经退行性变以及炎症失调状态有关,因此它常被用作研究免疫—自噬串扰机制的关键节点。
TBK1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TBK1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TBK1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TBK1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TBK1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。