TAUTCRISPR激活质粒(h): sc-402918-ACT

SLC6A6 编码人类牛磺酸转运蛋白 TAUT。TAUT 是一种依赖钠离子和氯离子的膜转运载体，介导对牛磺酸的高亲和力摄取，以维持细胞内牛磺酸储备。牛磺酸参与渗透压调节、膜稳定、钙稳态以及氧化还原平衡，因此 TAUT 的活性与细胞应激适应、线粒体功能及细胞凋亡调控密切相关。SLC6A6/TAUT 表达或牛磺酸转运能力的改变，与视网膜、心脏和神经系统等兴奋性组织的特异性易损性有关，并常在代谢应激与神经退行性变等研究背景中被关注。由于牛磺酸的可用性会影响炎症信号传导与蛋白质稳态，SLC6A6 也常用于氧化损伤与线粒体功能障碍的通路层面模型研究。

TAUT CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SLC6A6的表达。

TAUT CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的SLC6A6基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于SLC6A6转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性TAUT表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的SLC6A6位点，并能够研究内源性位点上依赖于TAUT的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SLC6A6表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟TAUT通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。