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Tau双切口酶质粒(h) | sc-400136-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Tau双切口酶质粒(h2) | sc-400136-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MAPT 编码人类微管相关蛋白 tau,这是一种神经元蛋白,负责稳定并组织微管网络,以支持轴突运输、神经突起生长以及细胞骨架的可塑性。Tau 的功能受包括磷酸化在内的翻译后修饰调控,这些修饰可调节其与微管的结合,并影响依赖细胞骨架的细胞内运输与应激反应。Tau 稳态失衡及其聚集与 tau 蛋白病(tauopathies)以及更广泛的神经退行性疾病生物学相关,在这些过程中,微管动力学改变与蛋白质稳态(蛋白质质量控制)紊乱与突触功能障碍相互交织。因此,MAPT 在调控神经元极性、细胞骨架重塑和蛋白质质量控制的通路中被广泛研究。
Tau 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MAPT 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAPT内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MAPT的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MAPT基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。