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TAP1双切口酶质粒(m) | sc-423265-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
TAP1双切口酶质粒(m2) | sc-423265-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Tap1 基因编码抗原加工相关转运体 1(TAP1),它是 ATP 结合盒(ABC)转运蛋白的一个亚基,可与 TAP2 形成异源二聚体,将由蛋白酶体产生的肽段从细胞质转运至内质网。该肽段供给是肽装载到 MHC I 类分子并随后向 CD8+ T 细胞呈递抗原所必需的,因此 TAP1 与适应性免疫监视的核心通路密切相关。TAP1 的活性还与干扰素驱动的炎症信号、内质网质量控制以及决定细胞免疫肽组的免疫蛋白酶体–MHC I 轴相互交织。在疾病相关模型中,TAP1 功能异常与 MHC I 细胞表面表达降低及免疫逃逸表型相关,为在免疫学、感染和肿瘤生物学等研究背景下开展机制研究提供了依据。
TAP1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Tap1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Tap1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Tap1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Tap1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。